利用生物发酵法既可生产混合长链二元酸也可生产单一碳数的长链二元酸,其工艺基本相同, 主要差别在于原料和菌种不同。步骤如下:

 菌种的制备

首先要筛选二元酸产酸菌,由土壤中分离出直链烷烃同化细菌,调查其二元酸生产能力,可得到的优良突变菌株———热带假丝酵母( c. t ropicalis) 变异菌种。

 发酵过程

以生产DC13为例,将菌种加入以正构十三烷烃为大宗底物的发酵罐中,温度保持在30 ℃左右,通气比为1∶1 ,搅拌通气培养六d 左右,生成并积累二元酸,经化验含酸量可达150g/ L 以上。碳源可以是正构烷烃和糖(如葡萄糖、蔗糖或糖蜜) 构成的双底物碳源(DSF) ,氮源可以使用各种无机氮和有机氮,最好是尿素,除碳源和氮源外, 还需生长必需的无机物和微量生长因子,如磷酸盐、食盐、硫酸镁等[1 ] 。

发酵产品后处理

产品的后处理相当关键,该部分投资占总投资的60 %左右,由于长链二元发酵液是由未反应的细分散相、油水乳化体、菌体细胞以及含有多种培养基组分的“水相”组成的,显然该体系是一种有别于其他发酵的多相、多组分的复杂分散体系, 分离难度大。该部分设备主要有菌体离心机、游离酸离心机、制粒机、成品干燥机、储罐及酸析罐等。

日本和我国的分离与纯化工艺经过了溶剂提取工艺、碱化压滤工艺、无溶剂法三个阶段的发展。用溶剂抽提法和碱化压滤法步骤繁杂,产品质量差。无溶剂法分离过程简单,目前较先进的技术是菌体回收采用微孔过滤技术。

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